Mycobacterium Tuberculosis Nukleinsyra- och rifampicinresistens
Produktnamn
HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis Nukleinsyra- och Rifampicinresistensdetekteringskit (smältkurva)
Certifikat
CE
Epidemiologi
Mycobacterium tuberculosis, kortfattat som Tubercle bacillus, TB, är den patogena bakterie som orsakar tuberkulos. För närvarande är de vanligaste förstahandsläkemedlen mot tuberkulos isoniazid, rifampicin och hexambutol, etc. Andrahandsläkemedlen mot tuberkulos är fluorokinoloner, amikacin och kanamycin, etc. De nyutvecklade läkemedlen är linezolid, bedaquilin och delamani, etc. På grund av felaktig användning av antituberkulosläkemedel och egenskaperna hos cellväggsstrukturen hos Mycobacterium tuberculosis utvecklar dock Mycobacterium tuberculosis läkemedelsresistens mot antituberkulosläkemedel, vilket medför allvarliga utmaningar för förebyggande och behandling av tuberkulos.
Rifampicin har använts flitigt vid behandling av patienter med lungtuberkulos sedan slutet av 1970-talet och har en betydande effekt. Det har varit förstahandsvalet för att förkorta kemoterapin hos patienter med lungtuberkulos. Rifampicinresistens orsakas huvudsakligen av mutationer i rpoB-genen. Även om nya antituberkulosläkemedel ständigt kommer ut, och den kliniska effekten hos patienter med lungtuberkulos också har fortsatt att förbättras, finns det fortfarande en relativ brist på antituberkulosläkemedel, och fenomenet med irrationell läkemedelsanvändning i klinisk praxis är relativt högt. Det är uppenbart att Mycobacterium tuberculosis hos patienter med lungtuberkulos inte kan dödas helt och hållet i tid, vilket så småningom leder till olika grader av läkemedelsresistens i patientens kropp, förlänger sjukdomsförloppet och ökar risken för patientens död.
Kanal
Kanal | Kanaler och fluoroforer | Reaktionsbuffert A | Reaktionsbuffert B | Reaktionsbuffert C |
FAM-kanalen | Reporter: FAM, Quencher: Ingen | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD och IS6110 |
CY5-kanal | Reporter: CY5, Släckare: Ingen | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
HEX (VIC) Kanal | Reporter: HEX (VIC), Quencher: Ingen | Intern kontroll | Intern kontroll | Intern kontroll |
Tekniska parametrar
Lagring | ≤-18 ℃ I mörker |
Hållbarhet | 12 månader |
Provtyp | Slem |
CV | ≤5,0 % |
LoD | Mycobacterium tuberculosis 50 bakterier/ml rifampicinresistent vildtyp: 2x103bakterier/ml homozygot mutant: 2x103bakterier/ml |
Specificitet | Den detekterar vildtyps-Mycobacterium tuberculosis och mutationsställena för andra läkemedelsresistensgener såsom katG 315G>C\A, InhA-15C>T. Testresultaten visar ingen resistens mot rifampicin, vilket innebär att det inte finns någon korsreaktivitet. |
Tillämpliga instrument: | SLAN-96P realtids-PCR-system BioRad CFX96 realtids-PCR-system LightCycler480® realtids-PCR-system |
Arbetsflöde
Om Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (som kan användas med Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) eller Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Column (HWTS-3022-50) från Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. används för extraktion, tillsätt 200 μL av den positiva kontrollen, negativa kontrollen och det bearbetade sputumprovet som ska testas i tur och ordning, och tillsätt 10 μL av den interna kontrollen separat till den positiva kontrollen, negativa kontrollen och det bearbetade sputumprovet som ska testas, och de efterföljande stegen ska utföras strikt enligt extraktionsinstruktionerna. Den extraherade provvolymen är 200 μL, och den rekommenderade elueringsvolymen är 100 μL.