Karbapenemresistensgen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Produktnamn
HWTS-OT045 karbapenemresistensgen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) Detektionskit (fluorescens-PCR)
Epidemiologi
Karbapenemantibiotika är atypiska β-laktamantibiotika med det bredaste antibakteriella spektrumet och starkaste antibakteriella aktiviteten.På grund av dess stabilitet mot β-laktamas och låga toxicitet har det blivit ett av de viktigaste antibakteriella läkemedlen för behandling av allvarliga bakterieinfektioner.Karbapenemer är mycket stabila mot plasmidmedierade β-laktamaser med utökat spektrum (ESBL), kromosomer och plasmidmedierade cefalosporinaser (AmpC-enzymer).
Kanal
| PCR-mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Intern kontroll | Intern kontroll |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Tekniska parametrar
| Lagring | ≤-18℃ |
| Hållbarhetstid | 12 månader |
| Provtyp | Sputum, rena kolonier, rektalpinne |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0 % |
| LoD | 103CFU/ml |
| Specificitet | a) Satsen upptäcker de standardiserade företagets negativa referenser, och resultaten uppfyller kraven för motsvarande referenser. b) Resultaten av korsreaktivitetstestet visar att detta kit inte har någon korsreaktion med andra respiratoriska patogener, såsom Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii. junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Respiratoriskt adenovirus, Enterococcus eller prover som innehåller andra läkemedelsresistenta gener CTX, SHV, mecA, SHV, SHV, etc. c) Anti-interferens: Mucin, Minocycline, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazon, Meropenem, Ciprofloxacin Hydrochloride, Levofloxacin, Clavulanic acid, Roxithromycin väljs ut för interferenstest, och resultaten visar att de ovan nämnda störande ämnen inte har några störande ämnen. till detektion av karbapenemresistensgener KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM och IMP. |
| Tillämpliga instrument | Applied Biosystems 7500 PCR-system i realtid QuantStudio®5 PCR-system i realtid SLAN-96P PCR-system i realtid (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 PCR-system i realtid LineGene 9600 Plus PCR-detektionssystem i realtid (FQD-96A，HangzhouBioer-teknik) MA-6000 Quantitative Thermal Cycler i realtid (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 PCR-system i realtid BioRad CFX Opus 96 PCR-system i realtid |
Arbetsflöde
Alternativ 1.
Rekommenderat extraktionsreagens: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (som kan användas med Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) av Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Tillsätt 200μL normal saltlösning till tallusfällningen.Efterföljande steg bör följa instruktionerna för extraktion, och den rekommenderade elueringsvolymen är100μL.
Alternativ 2.
Rekommenderat extraktionsreagens: Nukleinsyraextraktion eller reningsreagens (YDP302) av Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Extraktionen bör startas i strikt enlighet med steg 2 i bruksanvisningen (tillsätt 200 μL buffert GA till tallusfällningen , och skaka tills tallus är helt suspenderat).Använd det RNase/DNas-fria vattnet för eluering, och den rekommenderade elueringsvolymen är 100 μL.
Alternativ 3.
Rekommenderat extraktionsreagens: Macro & Micro-Test Sample Release Reagent.Sputumprovet måste tvättas genom att tillsätta 1 ml normal koksaltlösning till den ovannämnda behandlade tallusfällningen, centrifugeras vid 13000 r/min i 5 minuter och supernatanten kasseras (behåll 10-20 µL supernatant).För ren koloni- och rektalpinne, tillsätt 50 μL provfrisättningsreagens direkt till den ovannämnda behandlade tallusfällningen, och de efterföljande stegen bör extraheras enligt bruksanvisningen.
